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购买细胞注意事项
点击次数:1559 发布时间:2014-12-08

一、若客户收到T25培养瓶细胞
1、客户收到细胞先不开盖,放在培养箱静置若干小时后(看细胞密度而定)在倒置显微镜下观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议受收细胞时的培养基拍一张照片,观察培养基的颜色和是否有漏液情况,显微镜下拍细胞100X,200X各一张),排除细胞本身污染的情况;收到细胞未开封,出现污染状况我们负责免费发送一株细胞。 2、如为贴壁细胞,请在显微镜下观察细胞密度:a.未超过80%汇合度时,用75%酒精(建议配置75%酒精的水也是灭菌超纯水)喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后打开盖子,先用枪头把培养基吸出10ml左右,放在离心管里,然后瓶口过火(严禁直接倾倒),这样可以保证不污染,再用10ml的移液管,将剩余的培液全部吸出,放于离心管中,培养瓶中只剩余10ml左右培液就可以了。培养16hr(时间根据细胞生长情况调整)之后,传代或者冻存。b.超过80%汇合度时,请按细胞培养条件传代培养。具体步骤如下:1)弃去培养液,用3ml PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次;2)加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mMEDTA)于T25培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来;3)加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中,按要求分瓶。    3、如为悬浮细胞,吸出培养液,1000转/分钟离心5分钟,吸出上清,管底细胞用新鲜培养基悬浮细胞后移回培养瓶。注意:换液时一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。 
二、若客户收到2ml小管细胞
收到细胞以后,用75%酒精喷洒整个管子消毒后放到超菌台内,严格无菌操作;然后将小管细胞转移至T25培养瓶,加入9ml左右含FBS的培养基混匀,放入培养箱过夜培养后查看细胞汇合度:若未超过80%汇合度,换液继续培养,根据情况传代或者冻存。若超过80%汇合度,可直接进行传代(方法同上)。

 三、细胞出现问题,不予以重发的情况有哪些?
(1)客户造成细胞污染,不重发;
(2)客户不正确操作致细胞状态不好,不重发;
(3)非ATCC推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发;
(4)细胞状态不好,未提供细胞培养前3天照片的,不重发;
(5)细胞培养时经其它处理的,不重发;
(6)细胞收到2天内,未告知,不重发;
(7)视具体情况而定。
四、细胞出现问题,可重发的情况有哪些?判定标准是什么?
(1)细胞运输途中遭遇的各种问题,细胞丢失、破损、漏液等,重发;
(2)冻存的细胞复苏后,绝大多数细胞未存活,重发;
(3)存活的细胞静置24小时后,绝大多数细胞未存活,重发;
(4)冻存的细胞复苏后或存活的细胞静置4小时后并且未开封,出现污染,重发;
(5)视具体情况而定。
五、售后服务政策
细胞污染问题,请在收到产品48小时内,给我们提出真实的实验结果;细胞活性问题,请在收到产品7天内给我们提出真实的实验结果,我们调查核实后予免费调换,不收取任何费用。
    需要客户提供细胞培养说明、细胞操作处理方法、细胞质量问题反馈表;如果搞不清原因的,或者客户直接愿意支付购买价5.0折的费用直接复苏。

    如用户收到细胞8-30天之内,因处理不当造成细胞死亡或污染,我公司将以5.0折优惠价重新提供一株原细胞
细胞活力状态用台盼蓝染色法鉴定细胞活力。

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